Senk fòs:
● Enstriman configuré ak ekstraksyon asid nikleyik ak etap pirifye
● Enstriman configuré ak modil ekstraksyon ultrasons
● Enstriman configuré ak totalman otomatik
● Enstriman configuré ak anplifikasyon tanperati varyab
● Enstriman configuré ak twous reyaktif konplètman fèmen
1. Èske reyaktif deteksyon asid nikleyik yo bezwen ekstrè ak pirifye?
Prensip deteksyon asid nikleyik la se jan sa a: anba aksyon Jadendanfan, ADN polymerase yo itilize pou fè anplifikasyon reyaksyon chèn sou modèl ADN / RNA (ki mande transkripsyon ranvèse NA), ak Lè sa a, kantite siyal fliyoresan lage yo detekte pou detèmine. si echantiyon an gen asid nikleyik (ADN/RNA) patojèn yo dwe detekte.
1) Egzanp ki pa te ekstrè oswa pirifye ka genyen anpil konpozan ki afekte rezilta final la: nukleaz (ki ka fonn asid nikleyik sib la ak lakòz fo negatif), proteaz (ki ka diminye ADN polymerase ak lakòz fo negatif), metal lou. sèl (ki mennen nan inaktivasyon nan sintaz ak lakòz fo pozitif), twò asid oswa twò alkalin PH (ki ka lakòz reyaksyon an echwe), RNA enkonplè (ki mennen nan echèk transkripsyon ranvèse fo negatif).
2) Gen kèk echantiyon ki difisil pou anplifye dirèkteman: Gram-pozitif ak kèk parazit, akòz mi selil epè yo ak lòt estrikti, si yo pa ale nan pwosesis ekstraksyon ak pirifikasyon asid nikleyik, twous san ekstraksyon an ka echwe pou sa yo. echantiyon.
Se poutèt sa, li rekòmande pou chwazi twous tès la oswa enstriman ki konfigure ak etap ekstraksyon asid nikleyik la.
2. fè ekstraksyon chimik ou fizik à fragmentation ekstraksyon?
Anjeneral pale, ekstraksyon chimik ka aplike nan pi fò nan pre-tretman ak pirifikasyon.Sepandan, nan bakteri Gram-pozitif ki gen mi epè ak kèk parazit, li se tou ka a ke ekstraksyon chimik pa ka jwenn modèl efikas asid nikleik, sa ki lakòz fo deteksyon negatif.Anplis de sa, ekstraksyon chimik souvan itilize ajan fò, si elisyon an pa bon jan, li fasil pou prezante fò alkali nan sistèm reyaksyon an, sa ki lakòz rezilta kòrèk.
Fragmantasyon ultrasons sèvi ak kraze fizik, ki te itilize avèk siksè pa GeneXpert, yon antrepriz dirijan nan jaden an nan POCT pou itilizasyon imen, e li gen yon avantaj absoli nan ekstraksyon asid nikleyik nan kèk echantiyon konplèks (tankou Mycobacterium tibèkiloz).
Se poutèt sa, li rekòmande yo chwazi yon twous tès oswa enstriman ki konfigure ak yon etap ekstraksyon asid nikleyik.epi li pi bon si gen yon modil ekstraksyon ultrasons.
3. Manyèl, Semi-otomatik ak konplètman otomatik?
Sa a se yon pwoblèm nan pri travay ak efikasite travay.Kounye a, lopital bèt kay san anplwaye ase, ak ekstraksyon ak deteksyon asid nikleyik se yon travay ki mande sèten ladrès ak eksperyans.Pa gen okenn dout ke machin nan ekstraksyon ak deteksyon asid nukleik totalman otomatik se chwa pafè a.
4. Anplifikasyon tanperati konstan oswa anplifikasyon tanperati varyab?
Reyaksyon anplifikasyon an se yon lyen deteksyon asid nikleyik, ak teknoloji pwofesyonèl ki enplike nan lyen sa a se konplèks.Apeprè pale, yo itilize anzim pou anplifye asid nikleyik la.Nan pwosesis anplifikasyon an, yo detekte siyal fliyoresans anplifye oswa siyal fliyoresans entegre.Anjeneral pale, pi bonè siyal fliyoresans parèt, se pi gwo kontni jèn sib echantiyon an.
Anplifikasyon tanperati konstan se yon anplifikasyon asid nikleyik nan yon tanperati fiks, pandan y ap anplifikasyon tanperati varyab se yon anplifikasyon siklik entèdi dapre denaturasyon-annealing-ekstansyon.Tan anplifikasyon tanperati konstan yo te pote, pandan y ap tan anplifikasyon tanperati varyab anpil afekte pa pousantaj monte ak tonbe nan tanperati enstriman an (kounye a, anpil manifaktirè yo te kapab fè 40 sik anplifikasyon nan apeprè 30 minit).
Si kondisyon laboratwa yo bon epi dekoupaj an zòn se strik, li rezonab pou di diferans presizyon ant de yo pa pral gwo.Sepandan, anplifikasyon tanperati varyab pral sentèz plis pwodwi asid nikleyik nan yon tan relativman pi kout.Pou laboratwa san zòn strik ak pèsonèl fòmasyon pwofesyonèl, risk pou flit ayewosòl asid nikleyik pral pi gwo, fo pozitif la rive yon fwa flit rive, epi li trè difisil pou elimine.
Anplis de sa, anplifikasyon tanperati konstan tou gen plis tandans fè anplifikasyon ki pa espesifik lè echantiyon an konplèks (tanperati reyaksyon relatif la pi ba, ak tanperati ekstansyon ki pi wo, se pi bon spesifikasyon obligatwa primè a).
Osi lwen ke teknoloji aktyèl la konsène, anplifikasyon tanperati varyab se pi serye.
5. Ki jan pou fè pou evite risk pou yo flit nan pwodwi anplifikasyon asid nikleyik?
Kounye a, anpil manifaktirè yo chwazi tib PCR kalite glann kòm tib reyaksyon asid nikleyik, ki sele pa friksyon, ak denaturasyon tanperati a nan denaturasyon tanperati varyab nan anplifikasyon PCR tanperati varyab rive nan 90 degre.
Santigrad.Pwosesis repete ekspansyon ak chalè ak kontraksyon ak frèt se yon gwo defi pou sele tib PCR la, ak tib PCR kalite glann relativman fasil pou lakòz flit.
Li pi bon pou adopte reyaksyon an ak yon twous/tib konplètman sele pou evite flit pwodwi reyaksyon an.Li ta pafè si ta ka jwenn yon twous konplètman sele pou fè ekstraksyon ak deteksyon asid nikleyik.
Se konsa, nouvo machin totalman otomatik ekstraksyon ak deteksyon asid nikleyik New Tech a gen senk chwa pi wo yo.
Tan pòs: Aug-09-2023